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Ein STED-Mikroskop ist ebenfalls eine Variante des CLSM, bei dem die Auflösung dadurch verbessert wird, dass der Anregungspunkt durch Sättigung von Farbstoffübergängen stark verkleinert wird. Multiphotonenmikroskope erlauben Multiphotonenfluoreszenzmikroskopie und Higher Harmonic Generation. Je nach Abgrenzung des Begriffs "Laser-Scanning-Mikroskop" können auch Mikroskope hinzugezählt werden, bei denen Streifen im Präparat beleuchtet werden, um jeweils Teilbilder aufzunehmen, und diese Streifen dann ihre Position verändern. Anders als bei den zuvor beschriebenen Varianten ist die Bewegung des Anregungsbereiches jedoch nicht kontinuierlich. Hierzu gehören 3D-SIM-Mikroskope und die Lichtscheibenmikroskopie (SPIM bzw. selective plane illumination microscopy). Literatur James B. Pawley (Hrsg): Handbook of biological confocal microscopy. 3rd Edition. Springer Science and Business Media – LLC, New York NY 2006, ISBN 0-387-25921-X. Weblinks Die konfokale Laser Scanning Mikroskopie ( Zeiss-Broschüre)
3D-LSM. Arbeitsplatz mit Laser-Scanning-Mikroskop zur Strukturanalyse von Oberflächen Ein Laser-Scanning-Mikroskop (seltener Laserrastermikroskop; englisch laser scanning microscope, LSM, auch scanning laser microscope) ist ein Lichtmikroskop, bei dem ein fokussierter Laserstrahl ein Präparat abrastert ( Laserscanning, englisch to scan = 'rastern'). Die Abrasterung kann mit einem Punkt geschehen, durch mehrere Punkte gleichzeitig oder durch eine Linie. Die punktweise Rasterung des Präparats kann beispielsweise erreicht werden, indem der Laserstrahl durch sogenannte Scan-Spiegel waagrecht und senkrecht abgelenkt wird, bevor er durch das Objektiv auf den Anregungspunkt im Präparat fokussiert wird. Wenn ein dreidimensionales Bild aufgenommen werden soll, so geschieht dies, indem Bilder verschiedener Fokusebenen nacheinander erstellt werden. Dazu wird entweder das Präparat oder das Objektiv in der Höhe verschoben. In den meisten Fällen wird erzeugte Fluoreszenz aufgenommen, die entsprechenden Geräte gehören also zu den Fluoreszenzmikroskopen.
Synonym(e) Confocal microskopy; Konfokale Laserscanmikroskopie; Laserscanmikroskopie; Laser scanning microscopy; Laserscanningmikroskopie; Scanning laser microscopy Definition Nichtinvasive Methode zur hochauflösenden in-vivo-Darstellung von Gewebe in Echtzeit, durch die Verwendung von Laserstrahlen definierter Wellenlängen im Auflichtvefahren. Der Laserstrahl wird auf eine Ebene innerhalb der Haut fokussiert, an Grenzflächen mit hohem Brechungsindex reflektiert und auf einen Detektor geleitet. Durch eine vorgeschaltete Lochblende werden ausschließlich Signale aus einer definierten horizontalen Ebene zur Bildgebung herangezogen. Strukturen mit hoher Reflexion stellen sich hell dar, wie bspw. Keratine und Melanin. Die Methode eignet sich zur Differenzierung benigner und maligner oberflächlicher Hauttumoren melanozytärer und epithelialer Herkunft. Bei horizontaler Schnittführung mit einer Schnittdicke von 5 µm, gelingt die Beurteilung des Gewebes auf zellulärer Ebene bis zu einer Eindringtiefe von 250 µm.
Konfokales Imaging verlangt eine optimale Bildqualität. Mit LSM 800 wählen Sie ein flexibles und kompaktes konfokales Laser Scanning Mikroskop mit hochsensitiver GaAsP-Detektion und schnellem linearem Scanning. Fügen Sie Airyscan hinzu, das revolutionäre Detektionskonzept von ZEISS, und erzielen Sie eine 1, 7x höhere Auflösung in allen drei Dimensionen, mit der Sie ein 5x kleineres konfokales Volumen erreichen. Erzielen Sie eine Sensitivität, die alle konventionellen Konfokalmikroskope in den Schatten stellt.
Im Wesentlichen beruht die Technik darauf, dass ein Laserstrahl die Probe Punkt für Punkt belichtet. Das reflektierte Licht wird durch eine relativ einfache Vorrichtung (wenngleich von extrem hoher Empfindlichkeit), einem Sensor (PMT = engl. photomultiplier tube) aufgezeichnet und dann wird das Bild Pixel für Pixel von einem Computer / Software zusammengesetzt. Die Zwei-Photonen-Laser-Scanning-Mikroskope noch hoben die erreichbare Auflösung in der Mikroskopie auf eine neue Stufe. Die Ergebnisse der Multi-Photonen-Anregung bezüglich "virtueller" optischer Schnitte und der überlegene Kontrast dieser Instrumente macht sie zu einer idealen Wahl für die Untersuchung von biologischem Material. Anmerkung: Diese Seite war ursprünglich unter der Domain zu erreichen und ist jetzt im Zuge der Fokussierung auf themenrelevante Inhalte hierher verlegt worden.
Durch die tausendfache Wiederholung dieses Prozesses erreichen Sie ein endgültiges Bild mit einer Auflösung von bis zu 20 nm, was den Ergebnissen eines Elektronenmikroskops nahekommt. Die Turn-Key-Plattform ELYRA ist das einzige verfügbare Hochauflösungssystem, mit dem Sie 2 verschiedenen Techniken, PAL-M und SR-SIM, kombinieren können. Diese Technik, die eine hohe Flexibilität bietet, basiert auf einer lasergenerierten strukturierten Beleuchtung. SR-SIM ist mit konventionellen Fluorophoren und Färbeprotokollen kompatibel und erlaubt Schnitte in Z-Richtung mit bis zum Doppelten der lateralen und axialen Auflösung konventioneller Lichtmikroskope. Mit ELYRA können Sie die optimale Hochauflösungstechnik für Ihre Probe wählen. Wenn Sie eine noch höhere Auflösung benötigen, ermöglicht Ihnen Carl Zeiss die Kombination der herausragenden Auflösungsleistung der Elektronenmikroskopie mit fluorophormarkierten Strukturen in Ihrem Fluoreszenzmikroskop. Mit unserer flexiblen Lösung Shuttle & Find für die korrelative Licht- und Elektronenmikroskopie (CLEM) finden Sie Ihre Region of Interest im Elektronenmikroskop nach der Detektion Ihrer Fluoreszenzsignale im Lichtmikroskop mühelos wieder.
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